Evaluation of UMELISA CHAGAS™ with the incorporation of new monomeric and chimeric peptides representative of different regions of Trypanosoma cruzi / [Evaluación del UMELISA CHAGAS® con la incorporación de nuevos péptidos monoméricos y quiméricos representativos de diferentes regiones de Trypanosoma cruzi].

Introduction: Most people with Chagas disease develop specific antibodies against Trypanosoma cruzi. In early infection, IgM antibodies against T. cruzi are produced and later replaced for IgG antibodies during the course of the disease. The first symptoms of the infection may be very mild and atypical, which is why the disease is often not detected in the acute phase. Objectives: To evaluate the clinical and analytical sensitivity, and specificity, accuracy, and efficacy of UMELISA CHAGAS™ with the addition of new synthetic peptides in the solid phase representative of the shed acute phase antigen protein (SAPA) and the trypomastigote surface antigen (TSA). Materials and methods: We evaluated a mixed anti-T. cruzi titer performance panel and a Chagas seroconversion one, as well as positive and negative serum samples from endemic areas of the disease and positive samples for other diseases that may interfere with the assay. The Bioelisa CHAGAS assay, Chaga test recombinant ELISA v.4.0, Chagatest HAI, and SD BIOLINE CHAGAS Ab Rapid were used as reference tests. Results: The sensitivity of the assay was 97.73% (95% CI: 96,23-99,24) and the clinical specificity, 99.33% (95% CI: 98,88-99,78) while the efficacy and the accuracy were 98.96%. Conclusions: Our results show that the new solid phase of UMELISA CHAGAS® can be used for immunodiagnostic, blood certification, and epidemiological surveillance in endemic and non-endemic countries with high-risk populations.

Introducción. La mayoría de las personas con enfermedad de Chagas desarrolla anticuerpos específicos contra Trypanosoma cruzi. En la infección temprana se producen anticuerpos IgM contra T. cruzi que son reemplazados por IgG durante el curso de la enfermedad. Los primeros síntomas de la enfermedad suelen ser muy leves y atípicos, por lo que a menudo no se detecta en la fase aguda. Objetivos. Evaluar la sensibilidad y la especificidad clínica y analítica, la precisión y la eficacia del UMELISA CHAGAS® con la incorporación de nuevos péptidos sintéticos en la fase sólida representativos de la proteína SAPA (Shed Acute Phase Antigen) y del antígeno TSA (Trypomastigote Surface Antigen). Materiales y métodos. Se evaluó un panel de desempeño de título mixto anti-T. cruzi y uno de seroconversión de Chagas, así como muestras de suero positivas y negativas provenientes de zonas endémicas de la enfermedad y muestras positivas de otras enfermedades que podían interferir con la prueba. Las pruebas Bioelisa CHAGAS, Chagatest ELISA recombinante v. 4.0, Chagatest HAI y SD BIOLINE CHAGAS Ab Rapid, se emplearon como referencia. Resultados. Los porcentajes de sensibilidad y especificidad clínica fueron de 97,73 % (IC95% 96,23-99,24) y 99,33 % (IC95% 98,88-99,78), respectivamente. Se obtuvo un 98,96 % de eficacia y una buena precisión. Conclusiones. Los resultados demuestran que la nueva fase sólida del UMELISA CHAGAS® puede utilizarse para el inmunodiagnóstico, la certificación de sangre y la vigilancia epidemiológica en países endémicos y no endémicos con población de alto riesgo.

Evaluación del UMELISA CHAGAS® con la incorporación de nuevos péptidos monoméricos y quiméricos representativos de diferentes regiones de Trypanosoma cruzi / Evaluation of UMELISA CHAGAS™ with the incorporation of new monomeric and chimeric peptides representative of different regions of Trypanosoma cruzi

Resumen | Introducción. La mayoría de las personas con enfermedad de Chagas desarrolla anticuerpos específicos contra Trypanosoma cruzi. En la infección temprana se producen anticuerpos IgM contra T. cruzi que son reemplazados por IgG durante el curso de la enfermedad. Los primeros síntomas de la enfermedad suelen ser muy leves y atípicos, por lo que a menudo no se detecta en la fase aguda. Objetivos. Evaluar la sensibilidad y la especificidad clínica y analítica, la precisión y la eficacia del UMELISA CHAGAS® con la incorporación de nuevos péptidos sintéticos en la fase sólida representativos de la proteína SAPA (Shed Acute Phase Antigen) y del antígeno TSA (Trypomastigote Surface Antigen). Materiales y métodos. Se evaluó un panel de desempeño de título mixto anti-I cruzi y uno de seroconversión de Chagas, así como muestras de suero positivas y negativas provenientes de zonas endémicas de la enfermedad y muestras positivas de otras enfermedades que podían interferir con la prueba. Las pruebas Bioelisa CHAGAS, Chagatest ELISA recombinante v. 4.0, Chagatest HAI y SD BIOLINE CHAGAS Ab Rapid, se emplearon como referencia. Resultados. Los porcentajes de sensibilidad y especificidad clínica fueron de 97,73 % (IC95% 96,23-99,24) y 99,33 % (IC95% 98,88-99,78), respectivamente. Se obtuvo un 98,96 % de eficacia y una buena precisión. Conclusiones. Los resultados demuestran que la nueva fase sólida del UMELISA CHAGAS® puede utilizarse para el inmunodiagnóstico, la certificación de sangre y la vigilancia epidemiológica en países endémicos y no endémicos con población de alto riesgo.

Abstract | Introduction: Most people with Chagas disease develop specific antibodies against Trypanosoma cruzi. In early infection, IgM antibodies against T. cruzi are produced and later replaced for IgG antibodies during the course of the disease. The first symptoms of the infection may be very mild and atypical, which is why the disease is often not detected in the acute phase. Objectives: To evaluate the clinical and analytical sensitivity, and specificity, accuracy, and efficacy of UMELISA CHAGAS™ with the addition of new synthetic peptides in the solid phase representative of the shed acute phase antigen protein (SAPA) and the trypomastigote surface antigen (TSA). Materials and methods: We evaluated a mixed anti-T. cruzi titer performance panel and a Chagas seroconversion one, as well as positive and negative serum samples from endemic areas of the disease and positive samples for other diseases that may interfere with the assay. The Bioelisa CHAGAS assay, Chaga test recombinant ELISA v.4.0, Chagatest HAI, and SD BIOLINE CHAGAS Ab Rapid were used as reference tests. Results: The sensitivity of the assay was 97.73% (95% CI: 96,23-99,24) and the clinical specificity, 99.33% (95% CI: 98,88-99,78) while the efficacy and the accuracy were 98.96%. Conclusions: Our results show that the new solid phase of UMELISA CHAGAS® can be used for immunodiagnostic, blood certification, and epidemiological surveillance in endemic and non-endemic countries with high-risk populations.

Desarrollo de un método para determinar la concentración mínima inhibitoria en cepas de referencias de leptospiras / Development of a method to determine the minimum inhibitory concentration in reference strains from leptospiras

Se desarrolló un método para determinar la concentración mínima inhibitoria para las leptospiras, porque internacionalmente no existe un método estándar para medirla. Se utilizaron cepas de referencia, pertenecientes al complejo patogénico L. interrogans y L. biflexa frente a la penicilina, la ciprofloxacina, el cloranfenicol, la rifampicina, y la tetraciclina. La concentración mínima inhibitoria, fue definida como la menor concentración del antibiótico donde se observó la inhibición de la movilidad bacteriana por examen directo en campo oscuro. Los rangos fluctuaron para la penicilina desde 0,095 hasta 12-52 μg/mL, para la tetraciclina desde 0,156 hasta 3,13 μg/mL, para el cloranfenicol desde 0,08 hasta 12,52 μg/mL, para la rifampicina desde 0,08 μg/mL y hasta 1,56 μg/mL y para la ciprofloxacina desde 0,15 hasta 2,4 μg/mL. Los antibióticos que presentaron los valores más bajos fueron la ciprofloxacina, la rifampicina y la tetraciclina y el valor más elevado se obtuvo frente el cloranfenicol y la penicilina. En esta investigación fueron empleadas las cepas de los serogrupos que circulan más frecuentemente en Cuba. Este estudio permitirá en un futuro cercano, determinar la susceptibilidad antimicrobiana en cepas autóctonas aisladas de pacientes con leptospirosis, al nivel nacional(AU)

[Development of a method to determine the minimum inhibitory concentration in reference strains from leptospiras]. / Desarrollo de un método para determinar la concentración mínima inhibitoria en cepas de referencias de leptospiras.

A method to determine the minimum inhibitory concentration for leptospiras was developed, since there is not a standard method to measure it at the international level. Reference strains from the pathogenic complex L. interrogans and L. biflexa were used against penicillin, cyprofloxacine, chloramphenicol, rifampicine and tetracycline. The minimum inhibitory concentration was defined as the lowest concentration of antibiotic where it was observed the inhibition of the bacterial mobility by direct examination in dark field. Ranges for penicillin were from 0.095 to 152 microg/mL, for tetracycline from 0.156 to 3.13 microg/mL, for chloramphenicol, from 0.08 to 12.52 microg/mL, for rifampicine from 0.08 to 1.56 microg/mL, and for cyprofloxacine from 0.15 to 2.4 microg/mL. The antibiotics that showed the lowest values were cyprofloxacine, rifampicine and tetracycline, whereas the most elevated value was obtained against chloramphenicol and penicillin. The strains from the serogroups circulating more frequently in Cuba were used in this research. This study will allow in a near future to determine the antimicrobial susceptibility in autochthonous strains isolated from patients with Leptospirosis at the national level.